目的 觀察高糖誘導(dǎo)人視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞（HRECs）脯氨酸羥化酶2(PHD2)的表達(dá)變化和對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞屏障功能的影響。方法 將培養(yǎng)至融合的HRECs分為三組，分別為正常對(duì)照組、甘露醇對(duì)照組與高糖組。正常對(duì)照組細(xì)胞培養(yǎng)液含5 mmol/L葡萄糖，甘露醇對(duì)照組細(xì)胞培養(yǎng)液含5 mmol/L葡萄糖和25 mmol/L甘露醇，高糖組細(xì)胞培養(yǎng)液含30 mmol/L葡萄糖。培養(yǎng)24、48 h后收集細(xì)胞蛋白、上清液及RNA。蛋白免疫印跡法檢測(cè)細(xì)胞PHD2、缺氧誘導(dǎo)因子-1 alpha;（HIF-1 alpha;）及緊密連接蛋白o(hù)ccludin的蛋白表達(dá)水平；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞上清液中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）的含量；實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)細(xì)胞PHD2、HIF-1 alpha;、VEGF及occludin基因的轉(zhuǎn)錄水平；相對(duì)分子質(zhì)量7 times;104的異硫氰酸熒光素標(biāo)記的葡聚糖檢測(cè)細(xì)胞旁通透性。結(jié)果 與正常對(duì)照組相比，甘露醇對(duì)照組與高糖組HRECs中PHD2蛋白表達(dá)水平均先降低后升高，HIF-1 alpha;表達(dá)升高，occludin表達(dá)降低；高糖組細(xì)胞上清液中VEGF含量增加，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（PHD2：F=7.618、8.627，P＜0.05；HIF-1 alpha;： chi;2=7.692、7.652，P＜0.05；occludin：F=23.23、7.317，P＜0.05；VEGF：F=10.768、4.562，P＜0.05）。與正常對(duì)照組相比，甘露醇對(duì)照組與高糖組HRECs的PHD2、HIF-1 alpha;、VEGF及occludin基因轉(zhuǎn)錄水平升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（PHD2：F=5.69、14.27，P＜0.05；HIF-1 alpha;：F=6.07、10.47，P＜0.05；VEGF：F=12.31、9.14，P＜0.05；occludin：F=8.77、8.00，P＜0.05）。與正常對(duì)照組相比，甘露醇對(duì)照組與高糖組細(xì)胞旁通透性增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ chi;2=20.57、F=56.09，P＜0.05）。結(jié)論 高糖誘導(dǎo)HRECs PHD2表達(dá)發(fā)生變化。PHD2可能在內(nèi)皮細(xì)胞屏障破壞中發(fā)揮一定的調(diào)控作用，其機(jī)制與HIF-1 alpha;、VEGF有關(guān)。
引用本文： 梁小玲,魏麗清,周煥嬌,孫剛,楊誠(chéng),張熙芳,楊璐,林佩蓉. 高糖誘導(dǎo)人視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞脯氨酸羥化酶2表達(dá)變化和對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞屏障功能的影響. 中華眼底病雜志, 2013, 29(1): 35-39. doi: 復(fù)制