目的 構建白細胞介素18(interleukin18，IL-18)-PE38融合基因的真核表達載體，并研究其在小鼠軟骨細胞及3T3細胞中的表達,探討類風濕性關節(jié)炎的基因治療方法。方法 經(jīng)限制性內切酶雙酶切從質粒PRKL459K-IL18-PE38中獲取IL-18-PE38融合基因, 將其與真核表達載體PsecTag2B連接，轉化感受態(tài)菌，挑取單克隆培養(yǎng)并提取質粒，EcoRⅠ單酶切鑒定。脂質體轉染法將構建的真核表達載體轉染入3T3細胞及小鼠軟骨細胞中，分別設置空載體對照，通過熒光免疫細胞化學法鑒定轉染后瞬時表達情況。結果 EcoRⅠ單酶切后電泳鑒定顯示，所構建的真核表達載體PsecTag2B-IL-18-PE38片段長度約為6 000bp。熒光免疫細胞化學法、熒光顯微鏡攝片均顯示轉染融合基因組熒光表達強，空載體對照組熒光表達微弱。結論 IL-18-PE38融合基因真核表達載體構建成功，并在小鼠軟骨細胞及3T3細胞中表達，為類風濕性關節(jié)炎的基因治療研究奠定基礎。

引用本文： 吳瑕,楊春蕾,張林,李虹,陶大昌,屈藝. 基因重組免疫毒素白細胞介素18-PE38融合基因治療類風濕性關節(jié)炎的初步研究. 中國修復重建外科雜志, 2005, 19(4): 306-309. doi: 復制

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