目的 體外構(gòu)建組織工程骨膜，研究生物衍生羊膜(human acellular amniotic membrane, HAAM)對(duì)成骨細(xì)胞分化的影響。方法采用人胚骨膜來源的成骨細(xì)胞與HAAM體外復(fù)合培養(yǎng)構(gòu)建組織工程骨膜（n=60）。于培養(yǎng)后2、4、6、8和10 d，分別提取總RNA，經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，行實(shí)時(shí)定量PCR，分別擴(kuò)增成骨細(xì)胞特異轉(zhuǎn)錄因子（Cbfa1）和成骨細(xì)胞特異基因（Osterix），讀取擴(kuò)增循環(huán)數(shù)（cycle threshold,Ct）。以單純培養(yǎng)的成骨細(xì)胞作為對(duì)照組(n=20)。結(jié)果 實(shí)驗(yàn)組Cbfa1表達(dá)以培養(yǎng)后2 d和10 d最高，且培養(yǎng)后2 d與4、6、8 d比較，以及培養(yǎng)后10 d與4、8 d比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt;0.05）；實(shí)驗(yàn)組Osterix表達(dá)隨培養(yǎng)時(shí)間延長逐漸升高，培養(yǎng)后8 d達(dá)最高，與其余各時(shí)間點(diǎn)比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。對(duì)照組Cbfa1和Osterix表達(dá)均隨培養(yǎng)時(shí)間延長逐漸降低。組間各時(shí)間點(diǎn)兩基因表達(dá)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt;0.05）。結(jié)論 成骨細(xì)胞與HAAM結(jié)合后，Cbfa1和Osterix可持續(xù)正常表達(dá)。HAAM作為支架材料，可誘導(dǎo)并促進(jìn)成骨細(xì)胞分化。成骨細(xì)胞與HAAM構(gòu)建的組織工程骨膜在分子水平已具有產(chǎn)生骨組織的基礎(chǔ)。
引用本文： 祁潔,楊志明,羅靜聰. 成骨細(xì)胞Cbfa1和Osterix基因在體外構(gòu)建組織工程骨膜中的表達(dá). 中國修復(fù)重建外科雜志, 2006, 20(6): 666-669. doi: 復(fù)制