目的 觀察轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（transforming growth factor β1，TGF-β1）對(duì)失神經(jīng)骨骼肌肌源性干細(xì)胞（muscle derived stem cell, MDSC）內(nèi)結(jié)締組織生長(zhǎng)因子（connective tissue growth factor, CTGF）的影響，探討TGF-β1CTGF通路致失神經(jīng)骨骼肌纖維化的作用及機(jī)制。方法 采用差速貼壁法分離培養(yǎng)并鑒定小鼠失神經(jīng)骨骼肌MDSC，用濃度為10 ng/ml的TGF-β1培養(yǎng)24 h前、后分別作表型鑒定。體外MDSC分別在TGF-β1濃度為10 ng/ml的培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)0、3、6、12、24和48 h，按時(shí)間點(diǎn)分為A～F組，Western blot檢測(cè)CTGF蛋白表達(dá)，實(shí)時(shí)熒光定量 RTPCR檢測(cè)CTGF mRNA水平。結(jié)果 免疫組織化學(xué)觀察示，加入TGF-β1干預(yù)前MDSC高度表達(dá)Sca-1，陽(yáng)性率96%；TGF-β1干預(yù)后Sca-1表達(dá)陽(yáng)性率明顯降低，陰性率＞99%。Western blot檢測(cè)A～F組CTGF與β-actin的平均吸光度（A）值比值分別為0.788±0.123、1.063±0.143、2.154±0.153、2.997±0.136、3.796±0.153和3.802±0.175，A～D組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)， D～F組間兩兩比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。A～F組RTPCR 的ΔCt值分別為1.659±0.215、1.897±0.134、2.188±0.259、2.814±0.263、2.903±0.126和3.101±0.186，A～D組組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），E組和F組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論 TGF-β1能促進(jìn)體外培養(yǎng)小鼠MDSC生成CTGF，在3～12 h時(shí)間范圍內(nèi)呈時(shí)間依賴關(guān)系。
引用本文： 聶銘博,陳振兵,洪光祥. 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1不同作用時(shí)間對(duì)體外培養(yǎng)小鼠失神經(jīng)骨骼肌肌源性干細(xì)胞內(nèi)結(jié)締組織生長(zhǎng)因子的影響. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2007, 21(6): 557-560. doi: 復(fù)制