目的 探討人椎間盤細胞和關節(jié)軟骨細胞的分子表型差異,分析hBMSCs 經(jīng)TGF-β3 和BMP-7 聯(lián)合誘導后能否分化為軟骨細胞和髓核細胞。 方法 取9 例自愿捐贈者髂嵴骨髓20 ~ 40 mL 分離培養(yǎng)hBMSCs。取第4 代hBMSCs 行三維微球培養(yǎng)。根據(jù)基礎培養(yǎng)基中加入的生長因子不同,實驗分成 4 組,分別為加入10 ng/mL TGF-β3 組(A 組)、200 ng/mL BMP-7 組(B 組)、同時加入兩種生長因子組(C 組)以及空白對照組(D 組)。于培養(yǎng)后21 d,行組織學及免疫組織化學觀察;于培養(yǎng)后4、21 d 進行PCR 檢測Ⅰ、Ⅱ、Ⅹ型膠原、蛋白多糖和SOX9 基因的表達。 結果 培養(yǎng)后21 d,HE 染色示A 組和C 組細胞呈軟骨細胞樣形態(tài)特征,甲苯胺藍染色及免疫組織化學染色Ⅱ型膠原表達呈陽性。B 組和D 組細胞形態(tài)無明顯改變,PCR 檢測示培養(yǎng)后21 d,A、C 組SOX9、蛋白多糖、Ⅰ型膠原及Ⅱ型膠原表達較4 d 時明顯增加(P lt; 0.05)。B、D 組Ⅰ型膠原表達較4 d 時明顯增加(P lt; 0.05),SOX9、蛋白多糖及Ⅱ型膠原較4 d 時無明顯變化(P gt;0.05)。其中僅A組Ⅹ型膠原表達呈陽性。 結論 TGF-β3 和BMP-7 聯(lián)合應用能促進hBMSCs 分化更接近于椎間盤細胞,可能為椎間盤組織工程提供種子細胞。
引用本文: 豐干鈞,劉浩,陳曉禾,李秀群,趙獻峰,梁濤. hBMSCs 誘導分化類髓核細胞. 中國修復重建外科雜志, 2008, 22(12): 1470-1475. doi: 復制
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