目的 探討雙層殼聚糖（chitosan，CS）/HAP 復(fù)合支架作為骨軟骨組織工程支架的可行性，并結(jié)合兔自體BMSCs 修復(fù)骨軟骨缺損。 方法 采用凍干法和燒結(jié)法制作雙層CS/HAP 復(fù)合支架，檢測其理化特性。取日本大耳白兔骨髓4 ～ 6 mL，全骨髓培養(yǎng)法分離純化BMSCs，并鑒定。調(diào)整第2 代BMSCs 細(xì)胞密度為2 × 107 個/mL，應(yīng)用纖維蛋白膠種植技術(shù)，接種至雙層CS/ HAP 復(fù)合支架，體外構(gòu)建細(xì)胞- 支架復(fù)合物。取36 只日本大耳白兔，于右側(cè)膝關(guān)節(jié)股骨下端外側(cè)髁負(fù)重區(qū)，作一直徑4 mm、深3 mm 的圓柱形缺損，制備兔膝關(guān)節(jié)骨軟骨缺損模型。根據(jù)缺損區(qū)植入物的不同，分為A、B、C 3 組（n=12）。A 組：植入細(xì)胞- 支架復(fù)合物；B 組：植入雙層CS/HAP 復(fù)合支架；C 組：不植入任何材料，作為空白對照組。術(shù)后6、12 周取材，行大體及組織學(xué)觀察，采用改良Wakitani 法評分。 結(jié)果 雙層CS/HAP 支架CS 層孔隙率為76.00% ± 5.01%，孔徑為200 ～ 400 μm，平均300 μm，孔洞相通；HAP 層孔隙率為72.00% ± 4.23%，孔徑為200 ～ 500 μm，平均350 μm，孔洞相通，結(jié)合部結(jié)合好。全骨髓法培養(yǎng)BMSCs，第7 天可見集落形成，14 d 傳代；免疫組織化學(xué)檢測示CD44（+）和CD45（—）。大體觀察和組織學(xué)檢測顯示，A 組基本修復(fù)軟骨缺損，骨缺損修復(fù)不良，有骨小梁長入；B、C 組骨、軟骨缺損修復(fù)不良，組織學(xué)檢測以纖維組織或無新生組織形成，軟骨及骨缺損均明顯存在。術(shù)后6、12 周，A 組改良Wakitani 評分分別為（5.17 ± 1.17）分和（3.20 ± 0.75）分，均優(yōu)于B、C 組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論 雙層CS/ HAP 復(fù)合支架可作為骨軟骨組織工程支架，復(fù)合BMSCs 可修復(fù)兔關(guān)節(jié)軟骨與骨缺損，重建關(guān)節(jié)解剖結(jié)構(gòu)
引用本文： 張華亮,王文良,初殿偉,劉英杰,關(guān)靜. 雙層殼聚糖與HAP 復(fù)合支架的初步研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2008, 22(11): 1358-1363. doi: 復(fù)制