目的 探討1，25（OH）2VD3在誘導(dǎo)小鼠胚胎干細(xì)胞（embryonic stem cells，ESCs）向成骨細(xì)胞分化過程中的重要作用。 方法 取2 d 齡昆明小白鼠顱蓋骨進(jìn)行成骨細(xì)胞分離培養(yǎng)；參照并改進(jìn)zur Nieden 等的方法制備擬胚體（embryoid bodies，EBs）。將EBs 根據(jù)培養(yǎng)液不同分為4 組：A 組：不含白血病抑制因子EBs 培養(yǎng)液；B 組：EBs 培養(yǎng)液中添加50 μg/mL 維生素C、50 mmol/L β- 磷酸甘油；C 組：培養(yǎng)液同B 組，另每孔接種5 × 104 個第3 代成骨細(xì)胞；D組與C 組相同，另添加4 × 10-9 mol/L 1，25（OH）2VD3。檢測ALP 活性，實時定量PCR 檢測骨鈣素mRNA 的表達(dá)，茜素紅S 染色進(jìn)行礦化骨結(jié)節(jié)計數(shù)。 結(jié)果 EBs 貼壁后前5 d，各組ALP 表達(dá)未發(fā)生明顯變化，5 d 后ALP 表達(dá)逐漸增加，其中D 組在第20 天表達(dá)水平最高。光鏡下可見輪廓清晰大小不等的紅色結(jié)節(jié)。茜素紅S 染色測得A、B、C、D 組骨結(jié)節(jié)數(shù)分別為（20 ± 8）、（18 ± 5）、（31 ± 1）、（50 ± 1）個；實時定量PCR 測得A、B、C、D 組骨鈣素 mRNA 分別為10.18 ± 1.17、20.29 ± 1.03、18.84 ± 4.07、32.15 ± 5.23；C、D 組與A、B 組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05），A、B 組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P gt; 0.05），C、D 組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論 在濃度為4 × 10-9 mol/L 1，25（OH）2VD3和維生素C、β- 磷酸甘油共同作用下，有效促進(jìn)了ESCs 源性成骨細(xì)胞的產(chǎn)生。
引用本文： 孫亞東,楊學(xué)義,李鋒濤,竇忠英. 1，25（OH）2 VD3 誘導(dǎo)小鼠胚胎干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化的研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2008, 22(9): 1117-1120. doi: 復(fù)制
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