目的 研究BMSCs 移植對大鼠脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)后VEGF 受體胎肝激酶1(fetal liver kinase 1,F(xiàn)lk-1)基因和蛋白表達(dá)的影響,探討B(tài)MSCs 移植修復(fù)大鼠SCI 的機(jī)制。 方法 取4 周齡雄性Wistar 大鼠5 只,體重100 ~ 120 g,進(jìn)行BMSCs 分離及培養(yǎng)。取81 只Wistar 雌性大鼠,體重220 ~ 250 g,采用改良Allen’s 打擊裝置制備SCI 模型,隨機(jī)分為3 組:假手術(shù)組(A 組,n=21),僅咬除T8 ~ 10 棘突和椎板;DMEM 組(B 組,n=30),SCI 區(qū)周圍注射DMEM;BMSCs 組(C 組,n=30),SCI 區(qū)周圍注射BMSCs。于移植術(shù)后1、3、5 d,采用RT-PCR 方法檢測各組大鼠SCI 區(qū)Flk-1 基因表達(dá)的變化;于移植術(shù)后3、7、14 d,免疫組織化學(xué)方法觀察脊髓內(nèi)Flk-1 蛋白的表達(dá)。 結(jié)果 原代培養(yǎng)的BMSCs 細(xì)胞形態(tài)多樣,隨著傳代次數(shù)的增加,細(xì)胞形態(tài)逐漸趨于均一,多為扁平形和長梭形。RT-PCR 結(jié)果顯示,在移植術(shù)后1、3、5 d,C 組Flk-1 mRNA 表達(dá)水平與B 組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P gt; 0.05);但B、C 組與A 組比較,F(xiàn)lk-1 mRNA表達(dá)于術(shù)后1 d 明顯增加并達(dá)峰值(P lt; 0.01),術(shù)后3 d 下降(P lt; 0.01),至術(shù)后5 d 表達(dá)仍高于A組(P lt; 0.05)。免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示,移植術(shù)后3 、7 d,B 組Flk-1 蛋白表達(dá)較A 組顯著增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P lt; 0.01);術(shù)后14 d,A、B 組Flk-1 蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P gt; 0.05) ;移植術(shù)后3 d,B、C 組Flk-1 表達(dá)相似,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P gt; 0.05),移植術(shù)后7 、14 d,C 組Flk-1 表達(dá)明顯高于B 組(P lt; 0.01)。 結(jié)論 SCI 后BMSCs 移植對Flk-1 mRNA 的表達(dá)無調(diào)節(jié)作用,但上調(diào)Flk-1 蛋白的表達(dá),是修復(fù)SCI 的機(jī)制之一。
引用本文: 于德水,呂剛,王巖峰,劉麗波. BMSCs 移植對大鼠脊髓損傷后VEGF 受體胎肝激酶1 表達(dá)的影響. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2008, 22(8): 974-978. doi: 復(fù)制