【摘 要】 目的 探討通過細胞因子及其組合體外誘導臍血CD34+ 細胞轉分化成肝樣細胞的效果。 方法 采用密度梯度離心法分離臍血單個核細胞（mononuclear cell，MNC），從MNC 中獲得富集CD34+ 細胞。選用人白血病抑制因子、制瘤素M、bFGF、aFGF、肝細胞生長因子、EGF 及干細胞生長因子7 種細胞因子，濃度分別為10、10、10、10、20、20和50 ng/mL，設計了 49 種細胞因子組合，分別采用這些細胞因子組合體外培養(yǎng)臍血CD34+ 細胞，培養(yǎng)周期為28 d。以新
鮮臍血CD34+ 細胞作為對照。每7 天檢測誘導后細胞中細胞角蛋白19（cytokeratin19，CK-19）、CK-18、谷氨酰胺合成酶
（glutamine synthetase，GS）、人血清白蛋白（albumin，ALB）以及甲胎蛋白（α-fetoprotein，AFP）的mRNA 轉錄情況，并應用免疫熒光法、過碘酸- 雪夫（periodic acid-schiff，PAS）染色與吲哚菁綠（indocyanine green，ICG）染色法檢測細胞分泌ALB、合成糖原以及解毒能力，以此判斷是否存在臍血CD34+ 細胞體外向肝樣細胞的轉分化。 結果 在經細胞因子誘
導后的CD34+ 細胞中均可檢測到人肝細胞所能表達的CK-19 、CK-18 和GS 的mRNA 條帶，未能檢測出肝細胞特征性的
ALB 與AFP 的mRNA 條帶；而新鮮臍血CD34+ 細胞中以上5 種蛋白的mRNA 均未能檢出。免疫熒光染色觀察示誘導
前后的細胞中均未能檢測到ALB 的表達，且均不能有效吞噬ICG 染料。PAS 反應檢測結果顯示，經細胞因子誘導后的細
胞紫紅色糖原沉積區(qū)域較新鮮臍血CD34+ 細胞增大，出現(xiàn)紫紅色區(qū)域的細胞增多。 結論 臍血CD34+ 細胞體外經細胞
因子組合誘導后，雖有肝細胞相關蛋白mRNA 表達，但未能轉分化為肝樣細胞。
引用本文： 陳祎祺,蔡海波,譚文松. 臍血CD34+ 細胞體外誘導肝樣細胞的研究. 中國修復重建外科雜志, 2008, 22(6): 747-752. doi: 復制