【摘 要】 目的 為更好地將成肌細(xì)胞應(yīng)用于組織工程構(gòu)建，探討IGF-1 對原代人胚骨骼肌成肌細(xì)胞體外增殖與
分化的作用與機(jī)制。 方法 通過核素3H-TdR 摻入法測定不同濃度IGF-1（1、2、4、8、16 和32 ng/mL）作用下成肌細(xì)
胞的每分鐘射線脈沖數(shù)（count per minute，CPM）值，根據(jù)濃度-CPM 值量效曲線確定IGF-1 促增殖的適宜濃度。在生長
培養(yǎng)基中加入該濃度的IGF-1 用于實驗組細(xì)胞，對照組細(xì)胞僅接受生長培養(yǎng)基。分別觀察實驗組與對照組生長曲線，比
較兩組細(xì)胞增殖周期的變化。運用流式細(xì)胞技術(shù)及核素?fù)饺敕y定適宜濃度IGF-1 作用下，成肌細(xì)胞增殖周期的變化。
另選取不同濃度IGF-1（0、5、10、15、20、25、30 ng/mL）作用于成肌細(xì)胞，觀察4 d 后成肌細(xì)胞融合率，通過融合率-IGF-1濃度- 量效曲線確定IGF-1 促進(jìn)成肌細(xì)胞融合的最佳濃度，并將其用于實驗組，而未接受該濃度IGF-1 的成肌細(xì)胞作為對照組，分別測定兩組細(xì)胞融合率與磷酸肌酸激酶（creatine kinase，CK）含量并進(jìn)行比較。 結(jié)果 5 ng/mL 的IGF-1 為促成肌細(xì)胞增殖最佳濃度。對照組成肌細(xì)胞倍增時間為96 h；實驗組成肌細(xì)胞生長曲線左移，倍增時間縮短為60 h。對
照組DNA G1、S 期與G2M 期各亞周期所占時間分別是70.03、25.01 與0.96 h，實驗組為22.66、16.47 與20.87 h。實驗組與對照組成肌細(xì)胞CPM 峰值出現(xiàn)的時間分別是48 h 與96 h，與生長曲線流式細(xì)胞技術(shù)測定結(jié)果一致。IGF-1 促進(jìn)分
化研究顯示20 ng/mL IGF-1 為促成肌細(xì)胞分化最佳濃度。實驗組成肌細(xì)胞融合率較對照組提高30%，CK 合成量提高
2 000 mU/mL。 結(jié)論 IGF-1 對成肌細(xì)胞的增殖與分化均具有促進(jìn)作用，是通過減少 G1 期成肌細(xì)胞數(shù)量，增加S 期與
G2M 期細(xì)胞實現(xiàn)的。20 ng/mL IGF-1 能明顯增加成肌細(xì)胞融合率CK 合成。
引用本文： 岑石強(qiáng),張峻梅,黃富國,楊志明,解慧琪. IGF-1 促原代人胚骨骼肌成肌細(xì)胞體外增殖與分化的研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2008, 22(1): 84-87. doi: 復(fù)制