• 1 第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院骨科(重慶,400037);;
  • 2 解放軍第324 醫(yī)院神經(jīng)外科;

目的 探討成骨細(xì)胞特異性鈣黏蛋白(cadherin ectodomain Ⅱ,Cad- Ⅱ)涂布于同種異體脫鈣骨基質(zhì)材料(freeze-dried demineralized bone matrix,F(xiàn)DBM)對兔BMSCs 黏附、增殖及成骨分化能力的影響。 方法 取4 周齡日本大耳白兔10 只,體重0.61 ~ 0.88 kg,雌雄不限,常規(guī)分離培養(yǎng)BMSCs。取第2 代BMSCs(細(xì)胞密度1 × 106 個 /mL)分別與經(jīng)Cad- Ⅱ修飾的FDBM(實驗組)和未經(jīng)Cad- Ⅱ修飾的FDBM(對照組)復(fù)合,行MTT 檢測細(xì)胞增殖能力,細(xì)胞黏附實驗檢測細(xì)胞上架率和上架數(shù),倒置相差顯微鏡、掃描電鏡及HE 染色觀察細(xì)胞生長情況。另取第2 代BMSCs(細(xì)胞密度5 × 105 個/mL)分別與經(jīng)Cad- Ⅱ修飾的FDBM(實驗組)和未經(jīng)Cad- Ⅱ修飾的FDBM(對照組)復(fù)合培養(yǎng),行ALP 活性檢測和骨鈣素免疫組織化學(xué)染色觀察細(xì)胞成骨分化情況。 結(jié)果 MTT 檢測發(fā)現(xiàn)BMSCs 在經(jīng)Cad- Ⅱ修飾的支架材料上能正常增殖,但與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P  gt; 0.05)。實驗組細(xì)胞上架率為87.41% ± 5.19%,明顯高于對照組35.56% ± 1.75%(P  lt; 0.01);對照組每片材料細(xì)胞上架數(shù)平均為 2.6 × 104 個,實驗組平均高達(dá)5.0 × 105 個,明顯多于對照組(P  lt; 0.05)。倒置相差顯微鏡、掃描電鏡及HE 染色觀察均顯示實驗組支架上黏附細(xì)胞數(shù)量明顯多于對照組。成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)7 d,實驗組和對照組細(xì)胞均可表達(dá)骨鈣素,具有成骨細(xì)胞表型;培養(yǎng)14 d,實驗組和對照組ALP 活性分別為29.33 ± 1.53 和18.31 ± 1.32,骨鈣素免疫組織化學(xué)染色陽性率分別為83% ± 7% 和56% ± 7%,兩組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P  lt; 0.01);與同組7、21 d 比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P lt; 0.01),7 d 與21 d 組間及組內(nèi)比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P  gt;0.05)。 結(jié)論 Cad- Ⅱ修飾的FDBM 對BMSCs 增殖無明顯促進(jìn)作用,但能提高細(xì)胞黏附性,并促進(jìn)BMSCs 向成骨細(xì)
胞分化。

引用本文: 向強,鄧聰穎,張遠(yuǎn),張超,周躍. 成骨細(xì)胞特異性鈣黏蛋白涂布脫鈣骨基質(zhì)材料對BMSCs 黏附及成骨分化能力的影響. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2009, 23(5): 602-606. doi: 復(fù)制