目的 探索體外構建人外泌汗腺樣結構的方法。 方法 取自愿捐獻的正常腋部全層皮膚，分離培養(yǎng)汗腺腺上皮細胞，倒置相差顯微鏡下觀察。將汗腺腺上皮細胞以2 × 105 個/cm2 密度接種至Matrigel 凝膠下（A 組）、凝膠上（B 組）、凝膠中（C 組），進行三維立體培養(yǎng)，激光掃描共聚焦顯微鏡、HE 染色及免疫組織化學染色觀察有無汗腺樣結構形成。 結果 原代汗腺分泌部上皮細胞接種后24 h 可見細胞貼壁，貼壁細胞呈梭形，2 ～ 3 d 后細胞呈多克隆麥粒樣生長，14 d 后細胞融合呈鋪路石樣生長，融合后的汗腺腺上皮細胞呈扁平多角形，中間有較大圓形核；第1 代細胞形態(tài)與原代極為相似；第2 代細胞形態(tài)不規(guī)則，多數(shù)伸出長偽足；第3 代細胞多呈星形狀，細胞體積大，與鄰近細胞相互融合。A 組汗腺腺上皮細胞三維立體培養(yǎng)11 d 形成管腔結構；B 組汗腺腺上皮細胞立體培養(yǎng)8 h，細胞胞漿伸長呈絲狀，與鄰近細胞相連呈管腔或半管腔形，但細胞增殖不明顯；C 組汗腺腺上皮細胞三維立體培養(yǎng)2 ～ 3 d，細胞分裂增生，增生細胞彼此緊密排列成管腔結構，中間可見明顯腔隙，隨新生細胞增多，管腔結構逐漸演變?yōu)椴灰?guī)則球形結構。激光掃描共聚焦顯微鏡觀察示C 組形成球形結構，細胞團中央有管腔結構；球形結構HE 染色示為管腔結構，免疫組織化學染色示角蛋白18、癌胚抗原表達陽性，與汗腺分泌部管狀結構極為相似。 結論 汗腺腺上皮細胞在Matrigel 凝膠中三維立體培養(yǎng)可形成汗腺樣結構。
引用本文： 周立奉,伍津津,雷霞,路榮,魯元剛,唐書謙. 三維培養(yǎng)汗腺腺上皮細胞形成汗腺樣結構的初步研究. 中國修復重建外科雜志, 2009, 23(2): 156-160. doi: 復制
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