• 廈門大學(xué)附屬東南醫(yī)院骨科(福建漳州,363000);

目的 前交叉韌帶(anterior cruciate ligament,ACL)重建術(shù)腱- 骨愈合情況是手術(shù)成敗的關(guān)鍵因素。將不同濃度富血小板血漿(platelet-rich plasma,PRP)/ 異種小牛脫蛋白骨(deproteinized bone,DPB)凝膠復(fù)合物作為骨隧道填充物,觀察ACL 重建后腱- 骨愈合的組織學(xué)變化,探討該復(fù)合物對腱- 骨愈合的促進(jìn)作用,并確定PRP 的最佳濃度。 方法 取新西蘭大白兔耳中央動脈血8 mL,采用Landesberg 方法制備PRP,并將上清液作為稀釋劑,制備濃度分別為30%、60%、100% 的PRP。取新鮮新生小牛股骨骺端松質(zhì)骨,經(jīng)30% H2O2、乙醚交替浸泡24 h,連續(xù)6 次,制備DPB。將DPB 浸泡于不同濃度PRP 中并加入激活劑制備PRP/DPB 凝膠復(fù)合物。取54 只8 ~ 12 月齡新西蘭大白兔,體重(2.5 ± 0.4)kg,隨機(jī)分成3 組(n=18),分別為30%PRP/DPB 凝膠復(fù)合物組(A 組)、60%PRP/DPB 凝膠復(fù)合物組(B 組)、100%PRP/DPB 凝膠復(fù)合物組(C 組)。實驗動物制備雙側(cè)ACL 缺損模型。隨機(jī)取一側(cè)下肢以對應(yīng)濃度的PRP/DPB 凝膠復(fù)合物作為骨隧道填充物,以自體半腱肌肌腱重建ACL,作為實驗側(cè);另一側(cè)行自體半腱肌肌腱重建ACL,作為對照側(cè)。術(shù)后觀察各組動物一般情況,于術(shù)后3、6、12 周取材行大體觀察及HE 染色,光鏡下觀察腱- 骨愈合情況,并參照Demirag等標(biāo)準(zhǔn)對腱- 骨界面愈合情況進(jìn)行Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級半定量評價。 結(jié)果 大體觀察:術(shù)后3 周各組關(guān)節(jié)滑液稍增多,股骨隧道內(nèi)未見骨樣組織;6 周時各組無關(guān)節(jié)積液,隧道內(nèi)口見瘢痕組織增生;12 周時各組移植肌腱與骨隧道壁纖維組織連接致密。組織學(xué)觀察:A 組實驗側(cè)術(shù)后3 周,腱- 骨界面間形成新生肉芽組織界面;6 周時腱- 骨界面間出現(xiàn)寬度不一的Sharpey 樣纖維;12 周時腱- 骨界面Sharpey 樣纖維排列有序,形成不規(guī)則、模糊的“潮線”。B 組實驗側(cè)在各時間點腱-骨界面膠原纖維連接均優(yōu)于其他各組;術(shù)后3 周腱- 骨界面發(fā)現(xiàn)排列較規(guī)整的類軟骨細(xì)胞;6 周時腱- 骨界面骨隧道類軟骨細(xì)胞單位面積數(shù)量明顯多于其他組;12 周時腱- 骨界面可見移植物類軟骨細(xì)胞增生,分化成熟,Sharpey 樣纖維連接致密有序。C 組實驗側(cè)3 周時腱- 骨界面膠原纖維連接與A 組實驗側(cè)及對照側(cè)相似,6、12 周相對成熟的致密結(jié)締組織分化較差。參照Demirag 等標(biāo)準(zhǔn)對腱- 骨界面愈合進(jìn)行分級,術(shù)后3、6 周B 組實驗側(cè)和對照側(cè)、術(shù)后12 周B 組實驗側(cè)與C組實驗側(cè),比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P  lt; 0.05);其余各組實驗側(cè)之間以及同組實驗側(cè)與對照側(cè)比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P  gt; 0.05)。 結(jié)論 PRP 濃度為60% 時,其與DPB 的復(fù)合物形成凝膠后具有良好的生物相容性和骨誘導(dǎo)作用,可提高兔ACL 重建術(shù)后腱- 骨愈合。

引用本文: 趙耀,翟文亮. 富血小板血漿復(fù)合小牛脫蛋白骨重建前交叉韌帶腱- 骨愈合的組織學(xué)觀察. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2010, 24(11): 1323-1329. doi: 復(fù)制

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