目的 研究大鼠BMSCs 與小腸黏膜下層（small intestinal submucosa，SIS）復(fù)合后，施加動態(tài)應(yīng)變刺激能否使BMSCs 在體外分化為肌腱細(xì)胞（tenocytes，TCs）。 方法 取1 周齡SD 大鼠骨髓，采用貼壁培養(yǎng)法分離培養(yǎng)大鼠BMSCs，并用多向分化誘導(dǎo)法和流式細(xì)胞儀檢測進行鑒定。用生物力學(xué)試驗機行SIS 的拉伸破壞實驗，計算SIS 的彈性應(yīng)變。將分離純化后的第2 代BMSCs 以2.5 × 105 個/cm2 細(xì)胞密度種植于3 cm × 1 cm 大小的SIS 上，形成BMSCs-SIS復(fù)合物，固定于應(yīng)變培養(yǎng)裝置對其進行靜態(tài)培養(yǎng)2 d 后，施加應(yīng)變刺激（拉伸頻率為0.02 Hz，作用時間為15 min/h、12 h/d，應(yīng)變幅度為5%）動態(tài)培養(yǎng)5 d，作為實驗組；BMSCs-SIS 復(fù)合物持續(xù)靜態(tài)培養(yǎng)作為對照組；采用組織塊法分離培養(yǎng)SD 大鼠鼠尾TCs，用第2 代TCs 與SIS 復(fù)合，相同條件下靜態(tài)培養(yǎng)作為陽性對照組。掃描電鏡觀察應(yīng)變培養(yǎng)后BMSCs 形態(tài)變化，ELISA 法檢測培養(yǎng)后細(xì)胞上清液中2 種TCs 標(biāo)志蛋白Scleraxis 和Tenomodulin 的含量。 結(jié)果 分離培養(yǎng)的SD 大鼠BMSCs 經(jīng)多向分化誘導(dǎo)后，可以分化為成骨細(xì)胞和脂肪細(xì)胞，且流式細(xì)胞儀檢測示表面標(biāo)志抗原CD34、CD45 為陰性，CD90 為陽性，符合BMSCs 生物學(xué)特性。SIS 拉伸破壞實驗結(jié)果顯示，SIS 平均彈性應(yīng)變?yōu)?9.5%。掃描電鏡觀察示實驗組材料上細(xì)胞具有類TCs 形態(tài)；ELISA 法檢測示，實驗組應(yīng)變培養(yǎng)后細(xì)胞上清液中Scleraxis 和Tenomodulin 含量分別為（3.56 ± 0.91）μmol/L 和（4.27 ± 1.10）μmol/L，陽性對照組分別為（14.73 ± 2.30）μmol/L 和（10.65 ± 1.51）μmol/L，對照組分別為（0.23 ± 0.14）μmol/L 和（0.16 ± 0.10）μmol/L；3 組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論 適當(dāng)?shù)膽?yīng)變刺激培養(yǎng)可在體外誘導(dǎo)BMSCs 向TCs 方向分化，尚需進一步研究最佳的應(yīng)變刺激誘導(dǎo)條件。
引用本文： 廖梅旭,寧良菊,陳曉禾,李秀群,羅靜聰,秦廷武. 應(yīng)變誘導(dǎo)BMSCs 腱向分化的實驗研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2010, 24(7): 817-821. doi: 復(fù)制
版權(quán)信息： ?四川大學(xué)華西醫(yī)院華西期刊社《中國修復(fù)重建外科雜志》版權(quán)所有，未經(jīng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、改編