目的 通過檢測(cè)熒光微球655（quantum dot 655，QD655）標(biāo)記SD 大鼠BMSCs 的體外細(xì)胞毒性、細(xì)胞增殖、細(xì)胞貼附性以及標(biāo)記率，探討QD655 標(biāo)記BMSCs 及其示蹤的可行性。 方法 收集2 周齡健康SD 大鼠股骨和脛骨骨髓，貼壁培養(yǎng)BMSCs。取第3 代BMSCs 采用QD655 標(biāo)記作為實(shí)驗(yàn)組，以未標(biāo)記BMSCs 作為對(duì)照組，采用錐蟲藍(lán)拒染法檢測(cè)細(xì)胞存活率，MTT 法觀察QD655 對(duì)細(xì)胞增殖性的影響；取實(shí)驗(yàn)組BMSCs 向成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)2 周，采用茜素紅、ALP 染色定性鑒定細(xì)胞成骨分化能力，實(shí)時(shí)熒光定量PCR 鑒定標(biāo)記對(duì)細(xì)胞成骨分化的影響；分別在標(biāo)記后即刻、1、2、4、6 周采用熒光顯微鏡動(dòng)態(tài)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組BMSCs 陽(yáng)性標(biāo)記率；掃描電鏡觀察實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞在膠原/ 生物活性玻璃復(fù)合材料上的貼附性。 結(jié)果 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組細(xì)胞存活率均 gt;90%，比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）；培養(yǎng)1、3、5、7、9 d，兩組細(xì)胞增殖率比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。實(shí)驗(yàn)組BMSCs 經(jīng)成骨誘導(dǎo)分化2 周后，茜素紅及ALP 染色均呈陽(yáng)性，實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組BMSCs 的骨橋蛋白、骨鈣素、Ⅰ型膠原、ALP、BMP-2 mRNA 較對(duì)照組成倍數(shù)高表達(dá)。實(shí)驗(yàn)組BMSCs 標(biāo)記后即刻陽(yáng)性標(biāo)記率達(dá)96.50% ± 1.59%，隨著標(biāo)記時(shí)間延長(zhǎng)標(biāo)記率下降，標(biāo)記后1、2、4、6 周標(biāo)記率分別為93.30% ± 1.51%、72.40% ± 2.90%、40.10% ± 3.60%、10.00% ± 1.70%，對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)陽(yáng)性標(biāo)記率均為0。掃描電鏡觀察示實(shí)驗(yàn)組標(biāo)記后細(xì)胞和材料貼附良好。 結(jié)論 QD655 對(duì)大鼠BMSCs 標(biāo)記時(shí)間長(zhǎng)，標(biāo)記率及安全性高，是一種良好標(biāo)記 物。
引用本文： 姜曉銳,張?chǎng)析?楊科躍,江汕,金丹,王丹,裴國(guó)獻(xiàn). 熒光微球體外標(biāo)記大鼠BMSCs 的初步研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2010, 24(6): 744-748. doi: 復(fù)制