目的 表皮干細胞(epidermal stem cells,ESCs)能主動參與創(chuàng)面修復,促進創(chuàng)面再上皮化。建立糖尿?。╠iabetes mellitus,DM)大鼠模型,觀察DM 大鼠皮膚中ESCs 增殖分化相關蛋白——角蛋白19(keratin19,K19)、β1整合素(β1-integrin)、β- 連環(huán)素(β-catenin)及增殖細胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表達,探討DM
大鼠皮膚創(chuàng)面難愈合的潛在機制。 方法 20 只雄性SD 大鼠,體重250 ~ 300 g,隨機分為DM 組和正常對照組,每組
10 只。DM 組大鼠一次性腹腔注射鏈脲佐菌素(streptozocin,STZ,65 mg/kg)制備DM 大鼠模型,正常對照組不作處理。
給藥后4 周取兩組大鼠胰腺組織,HE 染色觀察胰島組織學變化。取兩組動物背部全層皮膚,分離培養(yǎng)ESCs,取第2 代
ESCs 行免疫細胞化學染色鑒定K19、β1-integrin、β-catenin 和PCNA 陽性表達,流式細胞儀檢測細胞周期,細胞接種1 周
后檢測兩組細胞克隆形成率。 結果 DM 大鼠造模成功率為90%。DM 組胰腺HE 染色可見胰島細胞數(shù)明顯減少,出
現(xiàn)變性壞死;正常對照組胰島細胞結構清楚,無變性壞死。DM 組大鼠ESCs 的K19、β1-integrin、β-catenin 及PCNA 陽性
表達分別為82.63 ± 14.77、21.59 ± 4.71、76.49 ± 6.58、90.77 ± 12.44,均低于正常對照組的151.24 ± 42.83、54.48 ± 17.43、116.39 ± 9.26、110.62 ± 20.67,差異均有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.01)。DM 組ESCs 克隆形成率為6.43% ± 1.01%,明顯低于正常對照組的11.37% ± 1.62%,差異有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.01)。流式細胞儀分析顯示DM 組88.89% 細胞處于G0/G1 期,凋亡細胞數(shù)為3.98%;正常對照組91.50% 細胞處于G0/ G1 期,無凋亡細胞。 結論 通過腹腔一次性注射65 mg/kg STZ 可有效建立DM 大鼠模型。DM 大鼠ESCs 數(shù)量少、增殖分化能力低可能是DM 創(chuàng)面難愈合的重要機制之一。
引用本文: 鐘清玲,劉德伍,劉繁榮,彭燕,張向榮,藍蔚. 糖尿病大鼠表皮干細胞及其增殖分化相關蛋白的研究. 中國修復重建外科雜志, 2010, 24(2): 133-137. doi: 復制