目的 水通道蛋白1(aquaporins 1,AQP-1)表達變化可能與細胞凋亡相關。通過觀察軟骨組織中AQP-1 和半胱天冬氨酸蛋白酶 3(Caspase-3)的表達,探討AQP-1 表達與軟骨細胞凋亡的相關性,為進一步研究骨性關節(jié)炎(os teoarthritis,OA)的發(fā)病機制提供實驗依據(jù)。 方法 取8 周齡清潔級雄性SD 大鼠72 只,體重286 ~ 320 g,平均300 g;隨機分為手術組、假手術組和對照組,每組24 只。手術組采用切斷前交叉韌帶及內側副韌帶、部分切除內側半月板方法制備大鼠雙膝OA 模型;假手術組僅暴露關節(jié)腔;對照組不作處理。造模后觀察大鼠一般情況,于1、2、4、8 周處死大鼠取膝關節(jié)標本行大體、組織學觀察;采用實時熒光定量PCR 檢測 AQP-1 和Caspase-3 mRNA 的表達情況;使用酶標儀檢測Caspase-3 蛋白酶活性;并對AQP-1 mRNA 表達與Caspase-3 mRNA 的表達及蛋白酶活性的相關性進行分析。 結果 術后共6 只大鼠死亡,均給予補充;其余大鼠均存活至實驗完成。各時間點對照組及假手術組膝關節(jié)軟骨外觀及結構均正常;隨時間延長手術組關節(jié)軟骨表面粗糙且有裂隙,可見大量贅生物,軟骨表層纖維化,細胞排列紊亂。參照Mankin 評分標準,造模后1 周各組組織學評分比較,差異均無統(tǒng)計學意義(P gt; 0.05);2、4、8 周時手術組與對照組、假手術組間比較,差異有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.05)。造模后1 周,手術組AQP-1、Caspase-3 mRNA 表達和Caspase-3 蛋白酶活性與假手術組及對照組比較,差異均無統(tǒng)計學意義(P gt; 0.05);而2、4、8 周時手術組以上指標均明顯高于對照組和假手術組(P lt; 0.05),且隨時間延長呈增高趨勢。AQP-1 mRNA 和Caspase-3 mRNA 表達成正相關(r=0.817,P=0.000),回歸方程為y=0.426 7x2+0.051 5x;AQP-1 mRNA 表達和Caspase-3 蛋白酶活性亦成正相關(r=0.945,P=0.000),回歸方程為y=15.423 0x+ 4 .392 8。 結 論 AQP-1 的表達上調可能與軟骨細胞凋亡相關,在OA 發(fā)病過程中AQP-1 表達的變化可能參與了OA 的發(fā)生、發(fā)展。
引用本文: 高航飛,任戈亮,徐燕,金成哲,蔣逸秋,林建生,王黎明,沈海琦,桂鑒超. 骨性關節(jié)炎水通道蛋白1 的表達與軟骨細胞凋亡相關性研究. 中國修復重建外科雜志, 2011, 25(3): 279-284. doi: 復制