目的 觀察外源性降鈣素基因相關(guān)肽（calcitonin gene-related peptide，CGRP）在大鼠BMSCs 遷移中的作用及對(duì)VEGF、血管黏附分子1（vascular cell adhesion molecule 1，VCAM-1）表達(dá)的影響，探討CGRP 通過(guò)BMSCs促進(jìn)血管生成的作用機(jī)制。 方法 全骨髓法分離、培養(yǎng)SD 大鼠BMSCs，采用Western blot 法于傳代培養(yǎng)1、2、3 周時(shí)檢測(cè)BMSCs 中CGRP 受體（CGRP receptor，CGRPR）蛋白的表達(dá)。使用濃度為1 × 10-8 mol/L 的CGRP 作用于BMSCs作為實(shí)驗(yàn)組，單純BMSCs 作為對(duì)照組，在培養(yǎng)72 h 時(shí)采用細(xì)胞趨化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)CGRP 對(duì)BMSCs 遷移的影響；在培養(yǎng)1、3、5、7 d 采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)CGRP 作用后VCAM-1 mRNA 的表達(dá)變化，采用免疫細(xì)胞化學(xué)染色、Western blot 法檢測(cè)CGRP 作用后VEGF 的表達(dá)變化。 結(jié)果 Western blot 檢測(cè)示BMSCs 穩(wěn)定表達(dá)CGRPR，2 周時(shí)表達(dá)最高。細(xì)胞趨化實(shí)驗(yàn)顯示，實(shí)驗(yàn)組CGRP 刺激后穿膜遷移細(xì)胞數(shù)（3.20 ± 1.77）個(gè)/HP，較對(duì)照組（1.11 ± 0.49）個(gè)/HP 明顯增多（t=4.230，P=0.001）。實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)示，實(shí)驗(yàn)組VCAM-1 mRNA 表達(dá)隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸增加，7 d 時(shí)最高；實(shí)驗(yàn)組3、5、7 d的VCAM-1 mRNA 表達(dá)量與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。免疫細(xì)胞化學(xué)染色示，培養(yǎng)1、3 d 兩組均無(wú)陽(yáng)性染色；培養(yǎng)5、7 d 實(shí)驗(yàn)組VEGF 染色呈陽(yáng)性，對(duì)照組無(wú)陽(yáng)性染色。Western blot 檢測(cè)示，培養(yǎng)1、3 d 兩組均未檢測(cè)到VEGF蛋白表達(dá)；培養(yǎng)5、7 d 實(shí)驗(yàn)組VEGF 蛋白表達(dá)量均明顯高于對(duì)照組（P lt; 0.05）；實(shí)驗(yàn)組5 d 的VEGF 蛋白表達(dá)量明顯高于7 d（P lt; 0.05）。 結(jié)論 CGRP 能促進(jìn)BMSCs 遷移及VEGF 表達(dá)，這可能是CGRP 調(diào)節(jié)骨內(nèi)部血流變化而影響骨代謝的機(jī)制之一。
引用本文： 王釗,金丹,陀泳華,郭小磊,文軍,周健,夏立恒,張永濤. 降鈣素基因相關(guān)肽促進(jìn)大鼠BMSCs 遷移及VEGF 的表達(dá). 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2011, 25(11): 1371-1376. doi: 復(fù)制