目的 BMSCs 作為雪旺細胞的替代細胞可提高周圍神經(jīng)損傷修復效果,但目前對于神經(jīng)支架內(nèi)添加適宜的種子細胞數(shù)量未達成共識。研究不同數(shù)量BMSCs 對大鼠背根神經(jīng)節(jié)(dorsal root ganglion,DRG)生長的影響。 方法 取4 周齡雄性SD 大鼠3 只,體重80 ~ 100 g,體外培養(yǎng)擴增BMSCs。取新生1 ~ 2 日齡 SD 大鼠3 只,雌雄不限,體重4 ~ 6 g,制備DRG。取第3 代BMSCs 制備BMSCs- 生物蛋白膠復合物,按照加入細胞數(shù)量的不同,將實驗分為A組(1 ×103 個)、B 組(1 × 104 個)、C 組(1 × 105 個)和D 組(0 個),并與SD 大鼠DRG 共培養(yǎng)。48 h 后通過形態(tài)學觀察,神經(jīng)絲蛋白200 和雪旺細胞S-100 免疫熒光染色,對SD 大鼠DRG 軸突生長長度、雪旺細胞遷移距離和軸突面積指數(shù)進行定量評價。 結(jié)果 48 h 后可見各組BMSCs 生長出多個長突起;雪旺細胞移行和軸突從DRG 長出,呈多方向性生長;BMSCs生物蛋白膠具有生物活性且影響DRG 生長。A、B、C 組DRG 軸突生長長度及雪旺細胞遷移距離均明顯大于D 組(P lt; 0.05),C 組小于B 組(P lt; 0.05),A、C 組間及A、B 組間差異無統(tǒng)計學意義(P gt; 0.05)。A、B 組軸突面積指數(shù)明顯大于D組(P lt; 0.05),C 組大于D 組但差異無統(tǒng)計學意義(P gt; 0.05),A、B、C 組間差異無統(tǒng)計學意義(P gt; 0.05)。 結(jié)論 乳鼠DRG 體外培養(yǎng)實驗,可作為研究周圍神經(jīng)損傷修復的體外模型。不同數(shù)量BMSCs 生物蛋白膠復合物對DRG 生長的影響具有量效關(guān)系,為組織工程神經(jīng)選用合適數(shù)量BMSCs 提供了理論依據(jù)。
引用本文: 許文靜,趙喆,趙斌,王玉,彭江,張莉,陳繼鳳,盧世璧. 不同數(shù)量BMSCs 對大鼠背根神經(jīng)節(jié)生長影響的實驗研究. 中國修復重建外科雜志, 2011, 25(10): 1245-1249. doi: 復制
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