目的 觀察外源性p16基因質(zhì)粒導入食管癌患者食管鱗癌細胞系Ec109后的表達及其對Ec109細胞增殖生長狀況的影響。方法 根據(jù)轉染質(zhì)粒的不同或是否行p16 cDNA質(zhì)粒轉染分為三組,每組分別為5個樣本。PcDNA3-P16轉染組(P16轉染組):采用脂質(zhì)體(Lipofectamine)為載體,將PcDNA3-P16表達質(zhì)粒導入Ec109細胞;空載體轉染組:用PcDNA3-neo空載體以上述相同方法轉染,作空白對照;未轉染組:未用PcDNA3-P16質(zhì)粒轉染,作陰性對照。應用Northern斑點雜交、免疫組織化學、免疫熒光檢測轉化細胞的P16蛋白變化;流式細胞儀分析細胞周期變化,DNA片段化電泳檢測細胞凋亡。結果 P16轉染組外源性p16基因在Ec109細胞中表達后,細胞生長速度減慢,克隆形成能力下降,瞬時表達時有細胞凋亡發(fā)生,穩(wěn)定表達后細胞存在G1期阻滯;空載體轉染組和未轉染組均未觀察到以上結果。結論 脂質(zhì)體介導的外源性p16基因轉染對Ec109細胞有生長抑制作用,p16基因瞬時表達可誘導細胞凋亡。
引用本文: 孫曉雁,劉錕,李謹革. 外源性p16基因?qū)κ彻馨┗颊甙┘毎档纳L抑制作用. 中國胸心血管外科臨床雜志, 2001, 8(3): 150-153. doi: 復制
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