目的 探討環(huán)狀精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-D-脯氨酸-賴氨酸短肽(Cyclo-RGDfK)能否提高去細(xì)胞瓣對(duì)肌成纖維細(xì)胞(myofibroblast)的黏附性能,以及RGD肽對(duì)Integrin αVβ3基因表達(dá)的調(diào)控。 方法 組織塊培養(yǎng)法獲取大鼠主動(dòng)脈壁肌成纖維細(xì)胞(myofibroblast),免疫熒光染色檢測(cè)波形蛋白(Vimentin)和α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)分子在培養(yǎng)myofibroblast中的表達(dá)。將去細(xì)胞瓣隨機(jī)分為3組(每組7個(gè)),A組:去細(xì)胞瓣未接受任何處理;B組:去細(xì)胞瓣與交聯(lián)劑1-乙基-3-(二甲基氨基丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)反應(yīng)36h;實(shí)驗(yàn)組:去細(xì)胞瓣與EDC反應(yīng)36h后,再與Cyclo-RGDfK反應(yīng)24h,使RGD肽共價(jià)結(jié)合于去細(xì)胞瓣。將第5代myofibroblast分別接種至各組瓣膜上。HE染色和掃描電子顯微鏡觀察細(xì)胞黏附增殖狀況,半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)Integrin αVβ3基因在各組的表達(dá)。 結(jié)果 免疫熒光染色顯示原代培養(yǎng)的myofibroblast生長良好,高表達(dá)Vimentin和αSMA分子。HE染色和掃描電子顯微鏡顯示myofibroblast在實(shí)驗(yàn)組的生長好于A組和B組,半定量PCR示Integrin αVβ3 mRNA在實(shí)驗(yàn)組的表達(dá)高于A組和B組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt;0.05),而A組與B組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.900)。 結(jié)論 Cyclo-RGDfK促進(jìn)myofibroblast在去細(xì)胞瓣上黏附,此效應(yīng)可能與RGD肽上調(diào)Integrin αVβ3基因表達(dá)有關(guān)。
引用本文: 董毅,董念國,史嘉瑋,等. 環(huán)狀RGDfK肽對(duì)肌成纖維細(xì)胞整合素αVβ3表達(dá)調(diào)控的實(shí)驗(yàn)研究. 中國胸心血管外科臨床雜志, 2008, 15(5): 360-364. doi: 復(fù)制