目的 觀察單免疫球蛋白白細(xì)胞介素1受體相關(guān)蛋白(SIGIRR)對高遷移率族蛋白B1(HMGB1)誘導(dǎo)的人肺泡上皮細(xì)胞株A549炎性反應(yīng)的影響。
方法 構(gòu)建含有SIGIRR cDNA全長的真核表達(dá)載體pCDNA3.1(+),瞬時轉(zhuǎn)染人Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞來源的A549細(xì)胞,使SIGIRR在A549細(xì)胞中過表達(dá),采用Western blot和RT-PCR法檢測其表達(dá)。HMGB1刺激A549細(xì)胞后,雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)檢測轉(zhuǎn)染前后核轉(zhuǎn)錄因子κB(NF-κB)轉(zhuǎn)錄活性的改變,ELISA檢測轉(zhuǎn)染前后炎癥因子腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細(xì)胞介素1β(IL-1β)蛋白表達(dá)水平的變化。
結(jié)果 轉(zhuǎn)染SIGIRR表達(dá)載體的A549細(xì)胞,其SIGIRR表達(dá)量顯著上升。HMGB1刺激后,雙熒光素酶報告系統(tǒng)檢測發(fā)現(xiàn),NF-κB轉(zhuǎn)錄活性明顯升高,而轉(zhuǎn)染SIGIRR表達(dá)載體后NF-κB轉(zhuǎn)錄活性下降。ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,過表達(dá)SIGIRR的A549細(xì)胞在接受HMGB1刺激后其炎癥因子TNF-α及IL-1β蛋白表達(dá)水平明顯低于對照組。
結(jié)論 SIGIRR表達(dá)上調(diào)可以抑制HMGB1誘導(dǎo)的A549細(xì)胞產(chǎn)生炎癥因子TNF-α和IL-1β。A549細(xì)胞轉(zhuǎn)染前后NF-κB轉(zhuǎn)錄活性的改變提示SIGIRR的抗炎作用可能與其參與NF-κB轉(zhuǎn)錄活性的調(diào)控有關(guān)。
引用本文: 黃勛,梁曉華,田豐,姜濤. SIGIRR對HMGB1誘導(dǎo)的A549細(xì)胞炎性反應(yīng)的影響. 中國呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志, 2011, 10(6): 577-580. doi: 復(fù)制